光激化学发光新一代化学发光.ppt

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1、光激化学发光,工作原理,性能参数,技术特点,系统平台,LiCA,放免,酶联免疫,化学发光,荧光免疫,60年代,70年代,80年代,90年代,免疫标记技术发展,国产,进口,酶促化学发光,直接化学发光,电化学发光,LiCA（LOCI）,是以纳米级高分子微粒为基础，由光激发的一种均相免洗的化学发光分析技术。具有快速、均相（免洗）、高灵敏度和操作简便等特点的新一代技术。是化学发光免疫分析技术的又一个新的里程碑,光激化学发光 LiCALight Initiated Chemiluminescent Assay,两种高分子微粒：感光微粒和发光微粒两种微粒近距离接近。是感光微粒接受 激发光照射释放出单线态氧

2、构成“氧桥”传递能量，使发光微粒发出光信号,LiCA技术基础,直径：200nm 包被亲和素 红色激光680nm照射 释放单线态氧,直径：200nm 用于包被抗体/抗原 接受单线态氧 产生610nm光,感光微粒,发光微粒,LiCA原理两种微粒,半衰期：4S作用距离：200nm,LiCA原理 单线态氧（能量载体）,三线态氧（基态）,单线态氧（激发态）,感光微粒亲和素,发光微粒-Anti-HBs,HBsAg,生物素-Anti-HBs,发射光610 nm,200nm,激发光680 nm,1O2,LiCA原理举例（双抗体夹心法）,不含待测抗原,200nm,能量的近距离转移转移的介质是单线态氧两种微粒相互

3、接近200nm,LiCA发光原理,光激化学发光=光能化学能光能,工作原理,性能参数,技术特点,系统平台,LiCA,均相反应反应充分速度更快,LiCA技术特点均相反应,酶标板，板式,磁微粒，微米级，非均相,LiCA微粒，纳米级，类均相,*,*,*,*,*,*,*,*,*,*,微粒包被,等质量比表面积 A:B=5,A,B,dA=200nm,dB=1m,等质量微粒（比表面积）,LiCA,磁微粒,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,LiCAAb,磁微粒Ab,LiCA抗体载量优势,准确,成本,快速,LiCA的技术特点,加样,孵育,15%,80%,检测,5%,随机误差/交叉污染,CV 5%,自动化平台,免

4、洗/免分离,类均相反应技术,纳米级别微粒包被,500 Tests/Hour,清洗,废液处理,大量纯化水清洗管路,管路定期更换（一般半年一换）,进口原装管昂贵,需达到无害环境标准繁琐,水质要求达标,高额隐性成本,免洗,提升经济和社会效益,采用680nm弱能量红光激发,单线态氧不易受外界环境因素干扰,取样量仅25l，试剂中有表面活性剂,LiCA的抗干扰性,2000-2009年光激化学发光相关文献,生命科学的基础研究,新药的筛选,目标小分子的多样性蛋白核酸糖,LiCA的应用拓展,LiCA的技术特点与优势,工作原理,性能参数,技术特点,系统平台,LiCA,LiCA SP 移液工作站,LiCA HT 均

5、相发光免疫分析仪,LiCA产品平台,样品臂,试剂臂,试管架,试剂仓,枪头架,微孔板,废物盒,LiCA SP 移液工作站,未包被任何抗原/抗体,96个反应空杯,LiCA微孔板,托盘,上盖板,LiCA HT 均相免疫发光分析仪,甲状腺T3T4FT3FT4TSHTSH-3ATPOATG,性激素BhCGPTFSHLHE2E3Prolactin,肿瘤标志物AFPCEACA12-5CA19-9CA153CA50CA24-2CY21-1fPSAPSANSESCCpro-GRPPG-/,心肌标志物cTnIMyOmCKMBBNPNT-proBNPhsCRP,新陈代谢C-peptideInsuliniPTHDPD

6、,传染性疾病HBsAgAnti-HBsHBeAgAnti-HBeAnti-HBcAnti-HAV IgMAnti-HBc IgMAnti-HCVAnti-HIVAnti-TP,LiCA项目菜单,工作原理,性能参数,技术特点,系统平台,LiCA,LiCA 系统的多中心临床评估,N=453,上海第一人民医院；参比试剂：雅培I2000,LiCA性能多中心临床评估（乙型肝炎）,LiCA性能多中心临床评估（肿瘤标志物）,N=200，上海市中山医院参比试剂：罗氏E170,LiCA性能多中心临床评估（肿瘤标志物）,N=500，上海市瑞金医院参比试剂：雅培I2000,LiCA性能多中心临床评估（甲状腺）,N=300，上海市第六人民医院参比试剂：西门子Advia centuar,AFP,HBsAg,4.50%,1.79%,4.91%,2.14%,批内,批间,LiCA的精密度,LiCA的TSH功能灵敏度,小结,化学发光是免疫检测新技术LICA是最新一代的化学发光检测技术LICA具有液相、免洗、快速、高通量、灵敏、准确的特点通过多中心的临床评估，基本上验证了LICA在乙肝、肿瘤标志物、甲状腺功能等项目的临床可用性LICA产品的质量基本已能与进口的雅培、罗氏和西门子等厂家的产品媲美。,