血清25-羟基维生素D、Th17Treg细胞失衡与新生儿缺氧缺血性脑病预后的相关性研究.docx

血清25-羟基维生素D、Thl7Treg细胞失衡与新生儿缺氧缺血性脑病预后的相关性研究屈菊梅，张龙，刘荣*陕西省延安市人民医院新生儿科，陕西延安716000摘要：目的探究缺氧缺血性脑病(HlE)患儿血清25-羟基维生素D(25(OH)D)及Thl7Treg细胞的水平，并分析25(OH)D及Thl7Treg细胞与预后关系:方法选取2019年1月-2021年1月本院收治的HIE患儿79例为研究对象(HlE组)，对HlE患儿进行临床分度，分为中度46例，重度33例；选取同时期本院健康新生儿79例为对照组。利用流式细胞术检测外周血中Treg细胞比率、Th17细胞比率并计算ThlThl7细胞比率；采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中25(0H)D、白细胞介素(IL)-17和IL-23及IL-Io和转化生长因子-(TGF-)水平。根据随访的HlE患儿神经发育情况，分为神经发育正常组52例和不良神经发育组27例。采用COX法分析影响HIE患儿预后不良的因素,结果与对照组相比，HIE组血清中IL-17(62.19±6.48)ng/Lvs(38.08±4.37)ngL>IL-23(23.10±3.55)ng/Lvs(12.85±2.46)ng/L水平、ThI7细胞的比率(3.94±0.89)%vs(1.97±O.35)%及Thl7/Treg细胞的比率(0.58±0.16)vs(0.16±().08)较高(/=27.418、21.094、18.309、20.868,P均=0.000)，25(OH)D(29.14±6.02)ng/mLvs(45.37±9.07)ngmL.IL-IO(46.81±6.88)ng/Lvs(63.45±9.16)ng/L、TGF-水平(27.19±3.95)ng/Lvs(37.75±4.82)ng/L、Treg细胞的比率(6.21±1.15)%vs(8.95±1.46)%较低(曰3.251、12.910、15.06K13.104,P均=0.0(X)；与中度组相比,重度组血清中IL-17(71.03±7.40)ng/Lvs(55.84±5.82)ng/L、IL-23(29.83±4.75)ng/Lvs(18.27±2.81)ng/L水平、ThI7细胞的比率(4.89±1.1I)%vs(3.26±0.74)%及7/Treg细胞的比率(0.89±0.24)vs(O.35±O.1O)较高(/=10.207、12.189、7.833、13.716,P均=0.000),25(OH)D(20.59±4.25)ng/mLvs(35.27±7.29)ng/mL,IL-IO(39.16±5.75)ng/Lvs(52.29±7.69)ng/L、TGF-B水平(22.67±3.30)ng/Lvs(30.43±4.22)ng/L、Treg细胞的比率(4.53±0.84)%vs(7.42±l.37)%较低(/=10.362,8.282、8.803、10.745,P均=O.(XX);与中度组相比，HIE重度组入院时、治疗14d后的NBNA评分(25.61±L91)分VS(27.84±1.86)分、(34.08±1.16)分VS(36.62+1.24)分较低(/=6.050、9.222,P均=0.000)。与神经发育正常组相比，不良神经发育组入院时、治疗14d后的NBNA(25.27±1.88)分VS(27.76±1.85)分、(32.5O±l.l1)分VS(37.15±1.26)分评分较低(/=5.643、16.182,P侬0.000):与神经发育正常组相比，不良神经发育组血清中IL-17(84.04±8.76)ng/Lvs(50.84±5.30)ng/L、IL-23(35.44±5.37)ng/Lvs(I6.69±2.57)ng/L水平、Thl7细胞的比率(5.33±1.21)%vs(3.22±0.73)%及Th17/Treg细胞的比率(1.13±0.31)VS(0.29±0.08)较高(/=20.977X21.042、9.663、18.488,P均=0.000),25(OH)D(13.49±2.79)ng/mLvs(37.26±7.69)ng/mL、IL-IO(29.62±4.36)ng/Lvs(55.73±8.l9)ng/L、TGF-水平(22.93±333)ng/Lvs(39.93±5.80)ng/L、Treg细胞的比率(3.58±O.67)%vs(7.58±1.4l)%较低(/=15.500、15.437、14.048、13.916,P均=0.0)。多因素CoX分析显示，低水平25(0H)D、Thl7/Treg细胞失衡是影响HlE患儿不良预后的危险因素(HR=2.459,HR=2.425,P<0.05)三结论HIE患儿血清25(0H)D呈低表达，外周血单个核细胞Thl7rreg细胞存在免疫失衡，25(0H)D缺乏和Thl7/Treg细胞失衡可能影响HIE预后不良发生Il关键词,新生儿缺氧缺血性脑病：25-羟基维生素D；ThI7/Treg细胞中图分类号：R722.1文献标志码：ARelationshipbetweenserum25-hydroxyvitaminD,Th17/TregcellimbalanceandprognosisofneonatalhypoxicischemicencephalopathyQUJu-mei,ZHANGlong.LIURong*DepartmentofNeonatology,Yan'anPeople'sHospital.Shaafixi76000,ChinaAbstract:ObjectiveToinvestigatethelevelsof25-hydroxyvitaminD25(OH)DinserumandThl7/Tregcellsinchildrenwithhypoxic-ischemicencephalopathy(HIE),andtoanalyzetherelationshipbetween25(OH)D.Thl7/Tregcellsandprognosis.MethodsAtotalof79casesofHIEinourhospitalfromJanuary2019toJanuary2021wereselectedastheresearchobjects(HIEgroup),accordingtotheclinicalclassificationofHIEchildren,theyweredividedintomoderate46casesandsevere33cases;79casesofhealthynewbornsinourhospitalatthesametimewereselectedasthecontrolgroup.TheratiosofTregcellsandTh17cellsinperipheralbloodweredetectedbyflowcytometry,andtheratioofThlZThl7cellswascalculated;thelevelsof25(OH)D,Interleukin(IL)-17,IL-23,IL-10andtransforminggrowthfoctor-(TGF-)inserumweredetectedbyenzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA).Accordingtothefbllow-upneurodevelopmentalstatusofHIEchildren.HlEchildrenweredividedintoneurodeVelopmentalIynormalgroup(52cases)andadverseneurodevelopmentalgroup(27cases).COXmethodwasusedtoanalyzethefactorsaffectingtheprognosisofHIEchildren.ResultsComparedwiththoseinthecontrolgroup,thelevelsofIL-17(62.19±6.48)ng/Lvs(38.08±4.37)ngLandIL-23(23.10+3.55)ng/Lvs(12.85±2.46)ngLinserum,theratioofThl7cells(3.94±0.89)%vs(1.97±0.35)%andtheratioofThl7Tregcells(0.58±0.16)vs(0.16±0.08)inHIEgroupwerehigher(r=27.418,21.094,18.309,20.868,allP=0.000).whilethelevelsof25(OH)D(29.14±6.02)ng/mLvs(45.37+9.07)ngmL,IL-10(46.81±6.88)ng/Lvs(63.45+9.16)ng/L,TGF-(27.19±3.95)ng/Lvs(37.75±4.82)ng/LJinserumandtheratioofTregcells(6.21±1.15)%vs(8.95÷1.46)%werelower(r=13.251,12.910,15.061,13.104,allP=0.000);comparedwiththoseinthemoderategroup,thelevelsofIL-17(71.03±7.40)ng/Lvs(55.84±5.82)ng/LJandIL-23(29.83±4.75)ng/Lvs(18.27±2.81)ng/Linserum,theratioofThl7cellsI(4.89±l.ll)%vs(3.26±0.74)%andtheratioofThl7Tregcells(0.89±0.24)vs(0.35±0.10)Jintheseveregroupwerelower(/=10.207,12.189,7.833,13.716,allP=0.000),whilethelevelsof25(OH)D1(20.59+4.25)ng/mLvs(35.27±7.29)ngmL,IL-10(39.16±5.75)ng/Lvs(52.29±7.69)ngL,TGF-(22.67+3.30)ng/Lvs(30.43+4.22)ng/LinserumandtheratioofTregcells(4.53±0.84)%vs(7.42±1.37)%werehigher(/=10.362,8.282,8.803,10.745,allP=0.000);comparedwiththemoderategroup,theNBNAscoreofthesevereHIEgroupatadmission(25.61±1.91)scorevs(27.84+1.86)scoreand14daysaftertreatment(34.08±1.16)scorevs(36.62±1.24)scorewaslower(t=6.050.9.222,allP=0.000).Comparedwiththenormalneurodevelopmentgroup,thepoorneurodevelopmentgrouphadlowerNBNAscoresonadmission(25.27±1.88)scorevs(27.76±1.85)scoreand14daysaftertreatment(32.50±l.lI)scorevs(37.15±1.26)score(/=5.643,16.182,allP=0.000);comparedwiththoseintheneurodevelopmentallynormalgroup,thelevelsofIL-17(84.04±8.76)ng/Lvs(50.84±5.30)ng/LandIL-23(35.44±5.37)ng/Lvs(16.69±2.57)ng/Linserum,theratioofTh17cells(5.33±1.21)%vs(3.22±0.73)%andtheratioofThl7Tregcells(1.13±0.31)vs(0.29+0.08)inadverseneurodevelopmentalgroupwerehigher(r=20.977,21.042,9.663,18,488,allP=0.000),whilethelevelsof25(OH)D(13.49±2.79)ng/mLvs(37.26±7.69)ngmL,IL-10K29.62±4.36)ng/Lvs(55.73+8.19)ngL,TGF-(22.93+3.33)ng/Lvs(39.93±5.80)ng/LinserumandtheratioofTregcells(3.58±0.67)%vs(7.58±1.41)%werelower(z=15.500,15.437,14.048,13.916,allP=0.000).MukivariateCOXanalysisshowedthatlowlevelof25(OH)DandimbalanceofThl7TregcellswereriskfactorsforpoorprognosisofHlE(HR=2.459,HR=2.425,P<0.05).ConclusionsTheexpressionof25(OH)DinserumislowinHIEchildren,andthereisimmuneimbalanceinTh17/Tregcellsofperipheralbldmononuclearcells.Thedeficiencyof25(OH)DandimbalanceofThl7/TregcellsmayaffectthepoorprognosisofHIE.Keywords:neonatalhypoxicischemicencephalopathy;25-hydroxyvitaminD;Th17/Tregcells新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxicischemicencephalopathy,HIE)是新生儿常见疾病，可造成不同程度的神经系统损伤。据统计HIE发病率占总新生儿的0.1%0.6%.HIE病情轻重有别，病情严重时可导致患儿机体多器官损伤，研究报道一部分存活下来的HIE患儿也会伴有神经系统功能缺陷山。缺血、缺氧是HIE发病的基础，但目前HIE发病机制尚不明确，相关研究证实HIE可能与脑损伤患者脑神经损伤有关。也有研究表明，HIE患儿脑部缺血后再灌注，会引发脑组织过度炎症反应，产生大量细胞因子，进一步促进患儿脑损伤。维生素D可作为神经激素影响神经系统的发育和功能，维生素D缺乏对胎儿脑发育、细胞损伤和调亡有重要影响久Thl7细胞是不同于Thl细胞和Th2细胞的一类细胞,通过分泌细胞因子发挥促炎作用。调节性T细胞(regulatoryTcell,Treg)是Treg细胞家族重要的一群。Thl7"reg细胞的比率在维持免疫稳态方面起重要作用，Th17/Treg细胞比例失衡可导致过敏反应的发生。目前25-羟基维生素D(25-hydroxyvitaminD,25(OH)D)和Thl7/Treg细胞与HIE的关系鲜有报道，本研究将探讨25(OH)D和Thl7/Treg细胞在HIE患儿血清中的表达及与患儿预后的关系，旨在为临床早期评估HIE患儿预后提供临床依据。1材料与方法1.1 一般资料选取2019年1月-2021年1月本院收治的H正患儿79例为研究对象(HlE组)，平均出生天数420(12.01±4.11)d,分娩胎龄3739周，平均分娩胎龄(37.87±2.18)周，母亲年龄25-33岁，平均年龄(27.69±3.07)岁。对新生儿HIE患儿进行临床分度向，分为中度46例，重度33例。纳入标准：符合HIE诊断标准；单胎新生儿；新生儿出生时孕周3739周；出生时重量25004000g;新生儿生存时间3个月；新生儿经MRl检查(Tl、T2、DWI)、连续脑电图检查，确定存在脑损伤情况。排除标准：合并严重感染性疾病、呼吸系统疾病的新生儿；合并窒息的先天性遗传性疾病、先天性心脏病；合并神经系统发育畸形、脑膜炎及产伤导致头颅血肿的患儿；合并糖尿病妊娠儿；严重贫血患儿；胆红素脑病患儿。选取同时期本院健康新生儿79例为对照组，平均出生天数420(12.24±4.18)d,分娩胎龄37-40周，平均分娩胎龄(38.64±2.21)周，母亲年龄24-34岁，平均年龄(28.19±3.25)岁。HlE组、对照组出生天数、分娩胎龄、母亲年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)。本研究通过本院伦理委员会批准，符合世界医学协会赫尔辛基宣言。1.2 研究方法1.2.1 样品采集HIE患儿在入院时采取外周血1-2mL,对照组取在体检时采取外周血12mL装于含肝素钠采血管中，平均分成两份，一份4C,4000rmin,离心IOmin,留上清，冻存于-80度冰箱中，待测；另一份直接置于-80°C冰箱保存。1.2.2 检测血清中25(0H)D、Thl7细胞因子及Treg细胞因子水平采用酶联免疫吸附(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)法检测血清中25(0H)D、ThW细胞因子白细胞介素(ImerIeUkin,ID-17和IL-23及Treg细胞因子IL-IO和转化生长因子-(transforminggrowthfactor-,TGF-)水平，操作步骤严格依据ELISA试剂盒指示说明进行。1.2.3 采用流式细胞术检测ThW和Treg细胞百分比率采用流式细胞术检测Treg细胞(Foxp3+CD4+CD25+)和Thl7(CD3+CD8IL-17+)细胞百分比率。取出冻存的的静脉血，解冻。4000r/min离心5min,分离出上层血浆成分，向试管中加入等体积的PBS,再加入淋巴细胞分离液，继续梯度离心，获取外周血单个核细胞(PBMC)。取PBMC加入离心霉素和高尔基体阻断剂，加入藻红蛋白(PE)标记的CD3单抗10L和FlTC-CD8单抗10L,4避光孵育20min,离心弃上清，PBS清洗2次，加入Th17细胞FixZPerm中固定液，反应15min,离心弃上清，PBS清洗2次，加入Th17细胞FixZPerm中溶血破膜液，离心弃上清，PBS清洗2次，然后加入IL-17A(FITC标记)进行胞浆染色，4C避光温育20min,PBS清洗一次后，重悬细胞，置于流式细胞仪中检测分析Thl7细胞比例变化，细胞计数采用CellQuest软件。取PBMC加入FlTC-抗CD4单抗10L和PE-抗CD25单抗10L,4避光孵育20min,PBS清洗2次，加入Treg细胞Fix/Perm中固定液，静置20min,离心弃上清，PBS清洗2次，加入Treg细胞Fix/Perm中溶血破膜液，离心弃上清，PBS清洗2次，力口入20LPE-抗人FOXP3单抗和10LPE-IgG2b,4避光温育20min,PBS清洗一次后，检测分析Treg细胞比例变化，细胞计数采用CenQUeSt软件。1.3 神经发育随访对患儿随访12个月，对新生儿的神经发育进行随访，不良神经发育结局为(1)脑瘫：符合标准化的临床神经检查或国际运动功能量表定义；(2)采用贝利婴幼儿发展量表测试为发育异常儿网；(3)住院或随访期间死亡。根据HIE患儿神经发育情况，将患儿分为神经发育正常组52例和不良神经发育组27例。1.4新生儿行为神经测定在室温(2527C),半暗的安静环境中，由一名经过新生儿行为培训的新生儿科医师采用鲍秀兰网制定的20项新生儿行为神经测查法对所有患儿于入院时、治疗Md后进行NBNA评分。1.5 统计学分析采用软件SPSS25.0对数据进行分析，正态分布的连续变量以均值土标准差(I±S)表示，两组之间比较采用t检验。计数资料以百分率()表示，两组之间比较采用好检验。采用COX法分析影响HIE患儿预后不良的因素。PV0.05为差异有统计学意义。2结果2.1HIE组和对照组血清25(0H)D、ThI7/Treg细胞及相关细胞因子水平比较与对照组相比，HIE组患儿血清中IL-17、IL-23水平及Thl7细胞的比率、Thl7/Treg细胞的比率较高(PVo.05),25(0H)D、IL-10、TGF-水平、Treg细胞的比率较低(P<0.05),见表1。表2j血道25(0H)D、Th17/Treg细胞及相关细胞因子水平比较(元士S)组别例数25(OH)D(ng/mL)IL-17(ng/L)IL-23(ng/L)IL-10(ng/L)TGF-(ng/L)H正组7929.14±6.0262.19±6.4823.10±3.5546.81±6.8827.19±3.95对照组7945.37±9.0738.08±4.3712.85±2.4663.45±9.1637.75±4.82f值-13.25127.41821.09412.91015.061尸值-0.0000.0000.0000.0000.000续表组别例数Thl7(%)Treg(%)Thl7/TregHlE组793.94÷0.896.21+1.150.58±0.16对照组791.97+0.358.95±1.460.16±0.08t值-18.30913.10420.868产值-0.0000.0000.0002.2不同程度HIE患儿血清中25(0H)D、Thl7/Treg细胞及相关细胞因子水平比较与中度组相比，H正重度组血清中IL-17>IL-23水平、Thl7细胞的比率、ThI7/Treg细胞的比率较高(P<0.05),25(OH)D>IL-10>TGF-水平、Treg细胞的比率较低(PVO.05)。见表2。表22组血清25(0H)D、Thl7/Treg细胞及相关细胞因子水平比较(x±5)组别例数25(OH)DIL-23IL-IO(ngmL)IL-17(ngL)(ng/L)(ng/L)TGF-(ng/L)重度组3320.59+4.2571.03+7.4029.83±4.7539.16+5.7522.67+3.30中度组4635.27+7.2955.84+5.8218.27±2.8152.29÷7.6930.43±4.22，值-10.36210.20712.1898.2828.803P值-0.0000.0000.0000.0000.000续表组别例数Thl7(%)Treg(%)Thl7/Treg重度334.89±1.114.53÷0.840.89±0.24中度463.26±0.747.42±1.37O.35±O.1O，值-7.83310.74513.716P值-0.0000.0000.0002.3不同时间新生儿NBNA评分评分比较与中度组相比,HIE重度组入院时、治疗I4d后的NBNA评分较低(P<0.05)o见表3。表3不同时间新生儿NBNA评分评分比较(M±5)组别例数NBNA评分(分)入院时治疗14d后重度3325.61+1.9134.08+1.16中度4627.84+1.8636.62÷1.24，值-6.0509.222P值-0.0000.0002.4 HIE患儿神经发育正常组和不良神经发育组一般资料比较神经发育正常组和不良神经发育组之间出生天数、体重、分娩胎龄、母亲年龄、心率差异无统计学意义(P>005),与神经发育正常组相比，不良神经发育组入院时、治疗14d后的NBNA评分较低(PV0.05)。见表4。表4HIE患儿神经发育正常组和不良神经发育组一般资料比较项目神经发育正常组(n=52)不良神经发育组(n=27)/值P值出生天数(d)12.11±4.I411.83±4.050.2870.775体重(kg)3.37±0.253.28±0.221.5790.118分娩胎龄(周)38.09±2.1637.44±2.241.2530.214母亲年龄(岁)27.49±3.0928.08±3.160.7990.427心率(次min)97.42±11.6299.18±12.080.6300.531NBNA评入院时27.76±1.8525.27±1.885.6430.000分(分)治疗14d后37.15±1.2632.50±l.ll16.1820.0002.5 神经发育正常组和不良神经发育组血清中25(0H)D、Thl7Treg细胞及相关细胞因子水平比较与神经发育正常组相比，HlE不良神经发育组血清中IL-17、IL23水平、ThW细胞的比率、ThI7/Treg细胞的比率较高(P<0.05),25(0H)D、IL-10、TGF-P水平、Treg细胞的比率较低(P<0.05),见表5。表5神经发育正常组和不良神经发育组血清25(0H)D、Th17/Treg细胞及相关细胞因子水平比较(元土S)组别例数25(OH)D(ng/mL)IL-17(ngL)1L-23(ngL)IL-IO(ngL)TGF-(ngL)不良神经发育组2713.49±2.7984.04±8.7635.44±5.3729.62±4.3622.93+3.33神经发育正常组5237.26±7.6950.84±5.3016.69±2.5755.73±8.1939.93+5.80f值-15.50020.97721.04215.43714.048尸值-0.0000.0000.0000.0000.000续表组别例数Thl7(%)Treg(%)Thl7Treg不良神经发育组275.33+1.213.58+0.671.13÷O.31神经发育正常组523.22+0.737.58+1.410.29+0.08，值-9.66313.91618.488产值-0.0000.0000.0002.6 COX法分析影响HIE患儿预后不良的因素单因素COX分析显示，25(OH)D>Thl7细胞比率、IL-17、IL-23和Treg细胞比率、IL-10、TGF-P均是影响HIE患儿预后的危险因素；多因素COX分析显示，低水平25(0H)D、Thl7Treg细胞失衡是影响HIE患儿不良预后的危险因素(HR=2.459,HR=2.425,PVo.05)。详见表6。表6影响HIE患儿不良预后的CoX分析变量单因素分析多因素分析HR95%CIPHR95%ClP出生天数0.8490.482-1.4960.118-体重0.7230.3711.4090.165-分娩胎龄0.9030.502-1.6240.104-母亲年龄0.8640.511-1.4620.116-心率1.0110.667-1.5340.078-Th17细胞比率2.2911.718-3.0540.007-IL-172.1981.624-2.9760.009-IL-232.2131.639-2.9880.007-Treg细胞比率2.3111.694-3.1520.006-IL-IO2.1841.587-3.0050.009-TGF-2.1661.593-2.9460.010-Thl7Treg2.8911.836-4.5510.0002.4251.609-3.6540.00425(OH)D2.7191.769-4.1820.0012.4591.633-3.7050.0043讨论3.1 HIE流行病学分析HIE是造成新生儿死亡、不同程度神经系统发育障碍的主要原因口叫HIE具有较高的发病率和致死率，已严重危害新生儿的健康。3.2 维生素D与HlE关系维生素D是中枢神经系统发育和榻伤后重要的神经错体。人体维生素D主要包括25(OH)D225(OH)D3,临床上血液中测量25(OH)D3和25(OH)D3,两者之和即为25(0H)D。另外研究发现维生素D缺乏会导致许多涉及全身或中枢神经系统炎症的疾病发生HL25(OH)D也可抑制动脉粥样硬化中炎症反应口叫Lowe等研究发现维生素D具有神经保护和免疫调节的特性，维生素D已被证明可以减少促炎性细胞Thl7的分化和增殖，并促进促炎细胞因子IL/7的产生，同时促进抗炎细胞因子IL-Io的产生。最近的临床研究表明，患有HIE的新生儿往往缺乏维生素D,维生素D补充剂可能在大脑发育最发达的时期发挥重要作用：婴儿期和儿童期四。McGinn等研究显示25(OH)D与HIE患儿脑损伤程度呈显著正相关，且低水平25(OH)D影响HIE患儿不良预后。本研究发现与对照组相比，HIE组患儿血清中25(0H)D水平显著下降，中度、重度HIE患儿血清中25(0H)D水平依次下降，提示HlE发生、发展可能与25(0H)D缺乏有关，推测25(0H)D缺乏可能影响新生儿脑神经功能及脑组织炎症反应，从而可能导致新生儿发生HIEo本研究发现HIE不良神经发育组血清中25(OH)D水平显著低于神经发育正常组，提示机体25(OH)D缺乏可能与HIE患儿预后不良发生有关。3.3 Thl7"reg细胞与HIE关系近期研究发现，Thl7/Treg细胞平衡对机体免疫功能的调节的具有重要作用，Thl7Treg细胞失衡在缺血缺氧性疾病发病机制中扮演重要角色I。Thl7细胞是近年来发现的可产生IL-17、IL-23等细胞因子的T细胞亚群。IL-17、IL-23是促炎因子。IL-17可通过作用于巨噬细胞、上皮细胞等，进一步促进促炎因子的表达。另有研究显示IL-17可促进淋巴细胞增殖，诱导促炎因子的表达，从而加重缺血部位引起的炎症反应，继而加重神经损害；IL-23在HIE患儿血清中呈高表达，且可通过IL-23/IL-17途径进一步促进IL-17的表达，介导炎症反应加重脑损伤。Treg细胞是主要分泌IL-Io和TGF-的T细胞亚群，在机体中可发挥抗炎作用。Treg细胞发挥免疫抑制作用依靠两方面，一方面，Treg细胞可直接杀伤CD4+T细胞和抗原呈递细胞；另一方面，Treg细胞通过分泌的IL-10、TGF-等细胞因子，发挥免疫抑制的功能”九本研究发现与对照组相比，HlE组患儿血清中IL-17、IL-23水平及Th17细胞的比率、ThI7/Treg细胞的比率显著上升，IL-10、TGF-B水平、Treg细胞的比率显著下降，中度、重度HIE患儿血清中IL-17、IL-23水平、ThI7细胞的比率、Th17/Treg细胞的比率依次显著升高，IL-10、TGF-水平、Treg细胞的比率依次显著下降，提示HIE发生、发展可能与Thl7/Treg细胞失衡有关，HIE患儿脑组织存在大量炎性细胞因子，推测Thl7Treg细胞失衡可能加重HIE患儿脑损伤。本研究发现不良神经发育组入院时、治疗14d后的NBNA评分明显较低于神经发育正常组，提示不良神经发育组治疗14d后新生儿仍存在严重的神经发育后遗症。本研究发现HIE不良神经发育组血清中IL“7、IL-23水平及Thl7细胞的比率、Thl7Treg细胞的比率显著高于神经发育正常组，血清中IL-10、TGF-。水平、Treg细胞的比率显著低于神经发育正常组，提示机体Thl7Treg细胞失衡可能参与HIE患儿预后不良发生。多因素COX分析显示，低水平25(0H)D、ThI7"reg细胞失衡是影响HlE患儿不良预后的危险因素，提示监测血清25(0H)D水平及Thl7/Treg比率有利于早期评估HlE患儿预后。综上所述，HIE患儿血清25(C)H)D呈低表达，外周血单个核细胞Thl7/Treg细胞存在免疫失衡，向Th17细胞偏移，25(OH)D缺乏和Thl7/Treg细胞失衡可能参与HIE预后不良发生。参考文献1孔玉显，张敬芳，李艳芳，等.新生儿缺氧缺血性脑病血清IGF-1、GH.NGB水平与NBNA评分的相关性分析J.中西医结合心脑血管病杂志,2020,18(8):1323-1325.KONGYuxian,ZHANGJingfang,LIYanfang,etal.CorrelationbetweenserumIGF-1,GH.NGBlevelsandNBNAscoresinneonateswithhypoxic-ischemicencephalopathy!J.JournalofCardiovascularandCerebrovascularDiseasesofIntegratedTraditionalChineseandWesternMedicine,2020,18(8):1323-1325.2WangSRWangD.LiHX,etal.InfluenceofmiR-34aoncerebralneuronalapoptosisinratswithcerebralischemiareperfusionthroughtheNotch1signalingpathwayJ.EurRevMedPhannacolSci,2019,23(18):8049-8057.3王洪蓉，汤晶晶.新生儿缺氧缺血性脑病血清高迁移率族蛋白Bl水平及与炎症反应和神经损伤的相关性J中国现代医学杂志,2020,30(8):119-123.WANGHongrong,TANGJingjing.Serumhighmobilitygroupbox-1proteinlevelinneonatalhypoxicischemicencephalopathyanditsrelationshipwithinflammatoryresponseandnerveinjuryJ.ChinaJournalofModernMedicine,2020,30(8):119-123.4张云朝维生素D在新生儿缺氧缺血性脑病中