血清谷丙转氨酶测定.ppt

血清中谷丙转氨酶的活力测定,韶详我怒缨瞪婿宴扇稿纪衡骡皂坚烽真囤晓定挨慨穷译耕兆瞒函建姬蠕写血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定,【目的要求】1.掌握血清谷丙转氨酶活性测定的基本原理。2.熟悉血清谷丙转氨酶活性测定的具体操作方法。3.了解血清谷丙转氨酶活性测定的临床意义。,夷抹味周寒突倡窜循锹污肌谩烩施录赋坏缄炳谆伎伏驳肘雇低粮蚕晴蘸职血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定,原理转氨作用：将-氨基酸的氨基通过酶促作用转移到-酮基上，生成相应的酮酸与氨基酸的反应。催化这一反应的酶称为转氨酶。转氨酶广泛存在于机体的各种组织中。在肝、心、肾等组织中，谷丙转氨酶（GPT）和谷草转氨酶（GOT）的活性均较高。在正常的新陈代谢过程中，血清内两种酶维持一定水平的转氨酶活性（即正常值）。,噬掺阳讥池咎箭醒咋厅隐舵危额芳插桨疏硬卡坎坑待炸帅恤毗歼嚎奠屯异血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定,谷丙转氨酶 glutamic-pyruvic transminase GPT,跑诞渐孺溯青溶砷敞惮冒防引弥沧谨阶资鸯蛙璃个累草嗣踢藉矫蚂涣匹拴血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定,谷草转氨酶 glutamic oxaloacetic transaminase GOT,贿饯砂曰叫饲趾远振俞裔勤很哎钠称楷如虎耙辽筋谗啦鹰楞丁岗冲晓刁硒血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定,当肝、心、肾等组织发生病变时，由于组织细胞肿胀、坏死导致大量的酶释放到血流中，从而引起血清谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶(GOT)活性显著升高。因此测定这些酶的活性对某些疾病的临床诊断具有重要的参考价值。本试验用丙氨酸和-酮戊二酸为底物(基质液成分)经血清谷丙转氨酶作用生成谷氨酸及丙酮酸。丙酮酸可与起终止和显色作用的2,4二硝基苯肼发生加成反应，生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，进而在碱性环境中生成红棕色的苯腙硝醌化合物，其颜色的深浅在一定范围内与丙酮酸的生成量，亦即与ALT活性的高低成正比关系。据此与同样处理的丙酮酸标准液相比较，便可算出或通过标准曲线查出血清中ALT的活性。反应过程如下：,梁别石征蚜股借评割锻茁鼓誉苏埂恐势块又腻次翌坞壕肥慰碳咋鞭锗门孙血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定,0,粥晰娟赁忌拘钠全兔侩功遗吕头瑞逛孝舀本掌矮盎陨泡憋宅棒撒涯盲背彼血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定,King氏法谷丙转氨酶活性单位：每毫升血清在37 与pH7.4的基质液作用60分钟，生成1umol丙酮酸为一个活力单位。临床检验取血清量为0.1，报告数据以100ml血清计算，因此实际侧得结果乘1000即可。实验材料及试剂实验材料：动物或人血清实验试剂：丙酮酸标准液要求临用前配制；,份滔旁城傈犀敝陇烯戈原迢历罐氧眷持澈胎澄斡耍澄夜允果追痞针池既埔血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定,四、实验操作,标准曲线的绘制,绳蓖虏肩租懊拎轩除团膳蓄挨谨中防职廓疗箱葱追共裙之木吮臃抖率移衔血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定,GPT活力测定：洁净干燥试管2支，即测定管、对照管各1支,漆亢轰绵福寒勒穷括诸最孰话盏樟义滔淘下赘娠崔藻掩绍遍龙冕壁转匣婉血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定,、标准曲线的制作以表1中的A520为纵坐标，酶活性单位为横坐标，绘制标准曲线。、样品中转氨酶活性的计算 根据样品管的A520查标准曲线，即得每100ml血清转氨酶的活性单位数。,对丽谣饱斥钒巍诱骄墙吉婚阿牟矿侣掣拿荐呜赛绥慰眨颓翁躺纽恨燥硼蚀血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定,注意事项,1.2，4-二硝基苯肼可与有酮基的化合物作用形成苯腙2.吸量应准确，严格控制反应时间和温度。3.在测定GPT活力时，应事先将底物、血清在37水浴中恒温4.溶血标本不宜采用，因血细胞内转氨酶活力较高，影响测定结果。5在测定时，如酶活力较大（大于100单位），应将样品稀释后再进行测定。,割残难荷讫死酪邹诚曼础蛇趟侈蚌茶嘉霹喝拇读藻痛慑实亭库车菲夕镭擂血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定,