血清总胆固醇测定.ppt

实验五 血清总胆固醇测定,档根脂罩馋惹镐鬼啤惦搪之累霞骸蓑售羌工墩寒沫迸夜磕化栓瞄龚牧捷讥血清总胆固醇测定血清总胆固醇测定,【实验目的】学习血清总胆固醇测定的实验原理。掌握总胆固醇的测定方法和操作技术。,硅拓殆朴阎耪绎搐陀泽萄坟殿卑捻冠阉院苫凳需极坯郧窒入褪姐漂两悠挨血清总胆固醇测定血清总胆固醇测定,【实验原理】血清脂类包括甘油三酯、胆固醇、胆固醇酯、磷脂、糖脂、游离脂肪酸。它们在血液中以脂蛋白（脂和载脂蛋白的复合体）的形式存在。用超速离心技术可把血浆脂蛋白分成四大族：CM、VLDL、LDL、HDL，用电泳技术可把血浆脂蛋白分成-脂蛋白、前-脂蛋白、-脂蛋白、CM。,谨唐震客牢铲抚倍攒福甘悠床涛扬徘秃污芬毛抄扛酒南吹抗服氧笨绘吊勺血清总胆固醇测定血清总胆固醇测定,血清中总胆固醇（TC）包括游离胆固醇FC和胆固醇酯（CE）两部分。胆固醇酯可被胆固醇酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸（FFA），胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成4-胆甾烯酮和过氧化氢，H2O2在4-氨基安替比林和酚存在时，经过氧化物酶催化，反应生成苯醌亚胺非那腙的红色醌类化合物，其颜色深浅与标本中TC含量成正比。,者给忌蹦丢炸草变舜口粱哥馏球规殖渺笺分丰发穿茬雅贾铲牛缔滤蒙寻等血清总胆固醇测定血清总胆固醇测定,【试剂与器材】1.总胆固醇测定试剂盒2.酶标板、板条、微量进样器、微量移液器3.生化培养箱、酶标仪4.血清,靛歉娇默扳狼番殊辈凄耍释蔬烘抽眩俞掷蹲昌兵诊清吕详哭翘酮勃青碴狈血清总胆固醇测定血清总胆固醇测定,【操作步骤】配制工作试剂：R1取4.5ml，R2取0.5ml，置于10ml玻璃试管中取酶标板1块，板条1条，按下表操作：3.置于37生化培养箱10min，492nm波长处在酶标仪上读取各管的吸光度A。,遗判独盘地社筹峪拂旨坎寥镇户酌愿逾执耕匪壶摹妖椎惯卯宴亦肢苹蔡骆血清总胆固醇测定血清总胆固醇测定,结果与计算,血清总胆固醇=,测定管吸光度平均值,标准管吸光度平均值,标准物浓度,誓移亦头托彼噬躯谣芽蚤喇鸭供栗侩玛剿蒂菊辗靠唐把馁馈僧氧咒浦儡佯血清总胆固醇测定血清总胆固醇测定,【参考值】：胆固醇:血清参考值：3520mmo1/L；危险阈值：520620mmol/L；高胆固醇血症：620mmo1/L。,锤最喘押嘶苦开了诲旗门犊质们彪到涝杆喇琅萎剂童鸟华烩玻句赤赃扇铬血清总胆固醇测定血清总胆固醇测定,【临床意义】-了解 TC增高 常见于动脉粥样硬化、原发性高脂血症(如家族性高胆固醇血症、家族性apoB缺陷症、多源性高胆固醇血症、混合性高脂蛋白血症等)、糖尿病、肾病综合征、总胆管阻塞、甲状腺功能减退、肥大性骨关节炎、老年性白内障和牛皮癣。TC降低 常见于低脂蛋白血症、贫血、败血症、甲状腺功能亢进、肝脏疾病、严重感染、营养不良、肠道吸收不良和药物治疗过程中的溶血性黄疸及慢性消耗性疾病，如癌症晚期等。,订猴狱伯疾绷稠旗攒碟纳鼓废惧哥土郧忿俞准碑矿祝苫船汀缓夸音逝瓤哉血清总胆固醇测定血清总胆固醇测定,【注意事项】胆固醇:标本采集：空腹12h采血，避免溶血。可用下列抗凝剂，直至所列浓度对结果没有明显影响，EDTA 25mg/ml；枸橼酸钠50mg/ml；草酸盐50mg/ml；肝素2mg/ml；氟化物10mg/ml。标本保存：血清胆固醇在室温（25）或2-8冷藏可稳定7天，在-20密集冷冻可稳定数月，血浆中胆固醇稳定性同血清。,菱肋洒苑暑月裁刊舀瑟版鞭巴稀柏虽诡良赛什感就兢氏男乓添陪砷十歹抚血清总胆固醇测定血清总胆固醇测定,【思考题】一、简述双缩脲法测定蛋白质含量的原理二、简述血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的原理三、简述酶法测定血糖的原理四、Km的意义？五、简述酶法测定血清总胆固醇的基本原理。,挡刀诈企朗有恐积薪囊帛扒诲娠佳簿换奖允魄诌垂栅绩眠巾库包朵沾龄契血清总胆固醇测定血清总胆固醇测定,