总β人绒毛膜促性腺激素测定标准操作规程.docx

总B人绒毛膜促性腺激素测定标准操作规程1检验原理：采用两步法免疫检测，运用化学发光微粒子免疫检测（CMIA）技术与灵活的检测模式的结合，测定人血清和血浆中的（B-HCG）。第一步，将样本和HCG抗体包被的顺磁微粒子混合。样本中的BHCG与BHCG抗体包被的微粒子结合。冲洗后进入第二步，加入口Y咤酯标记的BHCG抗体结合物。然后将预激发液和激发液加入反应混合物中；测量化学发光反应结果，以相对发光单位（RLUs）表示。样本中的BHCG含量和ARCHITECT1光学系统检测到的RLUs值成正比。2.试剂主要组成部分：2.1试剂盒微粒子：B-HCG抗体（小鼠、单克隆）包被的微粒子结合物：叫咤酯标记的B-HCG抗体（小鼠、单克隆）结合物2.2需要但未提供的试剂预激发液：预激发液含有L32%（W/V）过氧化氢激发液：激发液含有O.35N氢氧化钠浓缩清洗缓冲液：浓缩清洗缓冲液含有磷酸盐缓冲液。防腐剂：抗菌剂。3.样本要求：人血清（包括采集于血清分离管中的血清）或采集于肝素、肝素锂或EDTA钾抗凝管中的血浆。血清和血浆样本中应不含纤维蛋白、红细胞或其他颗粒物质。2-8°C可保存7天；Toe以下可保存12个月。样本应避免反复冻融。4.检验方法：仪器法（详见雅培il000标准操作规程）5.参考范围样本参考值(mlu/mL)血清、血浆非孕妇女V5早孕：5-15妊娠：ITo周：201.64->225000.0011-25周:22536.49->225000.0016-22周：8006.62->225000.0023-24周：1599.80-49412.656 .检验结果的解释：总B人绒毛膜促性腺激素项目通过四参数Logistic曲线拟合数据约简法(4PLC,Y加权)生成一条校准曲线7 .2结果单位转换：浓度(uIUml)Xl=浓度(IUml)7.检验方法的局限性7. 1本项目能够检测完整的hCG分子和游离-hCG亚基。7. 2hCG检测结果用于诊断时，应当与其他数据，如患者病史、症状、其他检测结果、临床表现等结合使用。单独依靠检测hCG不能识别正常妊娠和异位妊娠.7. 3如果hCG含量与临床情况不符或不受临床情况支持，那么需要通过其他hCG检测方法进行确认.其中包括尿液的定性检测.如果尿液中没有hCG,血清结果可能假性升高.也可以通过连续稀释样本确认结果.通常情况下，但不是所有情况，含有干扰物质的样本在稀释后将表现出非线性结果.7. 4总人绒毛膜促性腺激素项目只能检测早期妊娠.未被认可用于癌症标志物的筛查或监测等其他用途.因此不应用于其他用途.7. 5极少情况下，hCG含量出现连续上升的现象。原因包括但不限于以下几项：异嗜性抗体、非特异性蛋白结合、类hCG物质、滋养层或非滋养层肿瘤。无论是哪种免疫化学反应，药物或内源性成分中的未知干扰物都会干扰检测结果。7. 6检测出的hCG含量再低也不能排除怀孕的可能性。表现健康、未怀孕的个体也可能检测出低水平hCG。因为孕妇体内的hCG值每48小时翻一倍，所以检测出低含量hCG的患者需要在48小时后重新取样检测。8 .7取自绝经个体的样本可能由于hCG水平较低而生成弱阳性结果，这与怀孕无关。针对这种情况的做法是48小时后再重新取样检测，或采用其他hCG检测方法取样检测。9 .8由于本项目的检测灵敏度高，所以怀孕初期呈阳性的标本可能随着怀孕的自然终止转为阴性。10 9接受小鼠单克隆抗体制剂诊断或治疗的患者，其样本中可能含有人小鼠抗体(HAMA)。使用含有小鼠单克隆抗体的试剂盒检测此样本时，检测值可能会假性升高或降低。11 10人血清中的异嗜性抗体可与试剂中的免疫球蛋白发生反应，干扰体外免疫测定。经常与动物或动物血清产品接触的患者，其样本可能容易受到此干扰,并使检测结果出现异常值。可能需要其他信息用于诊断。12 11关于样本局限性的信息，参加本试剂盒说明书第一节8.产品性能指标8.1精密度：精密度W10%（总CV）8.2回收率：使用总B人绒毛膜促性腺激素项目检测含有已知hCG浓度的样本得到的平均回收率为100±10%8.3稀释验证：使用自动稀释程序以1：15的比例稀释样本并进行两次检测的结果与在同一份样本上使用样本稀释液进行1：15手工稀释程序得到的检测结果相比较。回收率为100±10%8.4分析灵敏度：总人绒毛膜促性腺激素项目的分析灵敏度WL2mIUmL08.5分析特异性：总B人绒毛膜促性腺激素项目的平均分析特异性通过与其他物质的交叉反应率来评估，检测含有15OmlUmL的FSH,250mIUM的LH以及100mIUmL的TSH样本时产生的交叉反应率<10%8.6携带率:从BfCG含量为L000,OoOmnJmL的样本到相邻的BTlCG含量为OmIUmLB-hCG的样本的携带率V7.5mIUmL-hCG08.7干扰性项目浓度干扰率血红蛋白500mgdL<10%胆红素20mgdL<10%甘油三酯3000mgdL<10%蛋白质12gdL和2gdL<10%8.8准确度（相关性）：与AXSYM总B-hCG项目比较，总B人绒毛膜促性腺激素项目在检测浓度范围为0T5,OOOinIU/mL的样本时，的斜率为1.00±0.15,相关系数（r）>0.95.9.临床意义：人绒毛膜促性腺激素（hCG）是一种唾液酸糖蛋白，分子量大约为46,000道尔顿。受精卵着床到子宫壁后不久，胎盘滋养细胞开始分泌出HCGo受孕后,hCG在血液中的水平迅速上升，这就使hCG成了对妊娠进行早期诊断和检测的可靠标志物。从生理学角度来看，hCG能够维持黄体的生长，从而保证孕酮和雌激素的合成，为子宫内膜提供保障。在普通妊娠过程当中，由胎盘生成这些激素。血清中的hCG上升到一个峰值浓度后便会下降，然后达到平稳水平。在妊娠正常的女性体内，HCG以完整的分子形态在血液中循环。其亚基迅速裂解并被肾脏所清除。hCG是一种胎盘激素，与促黄体生成素（LH）、尿促卵泡素（FSH）以及促甲状腺激素（TSH）相似。都是属于糖蛋白，由两个非共价结合且不相似的亚基和B组成，带有碳水化合物侧链。这些糖蛋白的。亚基非常相似。它们的生物学和免疫化学特性由B亚基决定。hCG和LH的B亚基在氨基酸组成方面具有相当大的同源性。hCG的免疫化学特性由其B亚基的特异性氨基酸残基决定。目前，已经可以使用高灵敏度的血清B-hCG项目定量检测血清hCG浓度，并用它预测自然流产，协助发现异位妊娠以及多胎妊娠。参考文献：ARCHITECTTotalB-hCG测定试剂盒说明书