免疫荧光一抗二抗的选择及其技巧.docx

免搜荧光一抗二抗的选择及其技巧他抗种1«及类型-如何选择二抗？如何选糅二抗一一依据抗种属及类型选择合适的二抗二抗广义上是指特坨和一抗进行特异性反应和结合的抗体.在免授学反附中,范常须要针对试验选择不同的二抗,艾美提能为您的科研I：作供应最适合和最全面的二抗产检测任何目的祀蛋白都有不止一种抗体可供选挥，同时在后维试验中也会有不同的检测方案，因此在选择二抗的时候要琼台考虑一抗的类型及后继检测方案的要求，一殷来说，选择合适的二抗须要从卜面几个方面考虑：抗的栉M来源】二抗应选用与运用的一抗相同的物种东源例如：假如你的一抗是小Ix源的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗(山羊抗小偎或者免抗小以等均可)：假如一抗是从免A1.清里制住的先源多克降抗体，则相应的二抗须要选择抗兔的二抗。即依据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗，艾美捷能为您供应最全的抗不同种属的原装进口二抗,包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、绵羊、人、豚鼠、猪、马、牛、鸡、眄等二抗。(一抗的类别亚型】二抗需与抗的类别或亚类相匹配.这通常是针对单克隆抗体而言.多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白.因此相桃的二抗就是抗IgG抗体.其中电克隆抗体的类别及亚类通常会在产½说明书中郁会有描述，假如你的一抗是小鼠IgM,那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM.假如单克峰一抗是小鼠IgG的.某一亚类<1.gG1.1.gG2a.1.gG2b,1.gG3，那么儿乎全部的抗小取IgG都可以与之结合，或者你也可以选择特地针对这一亚类的二抗，例如,似如你的一抗是小以IgG1.,那么你可以送齐抗的：抗，此种抗体在双标记试蛤中尤其适合.在不清晰一抗为何种突/亚类的状况下，可以选用抗相应物种IgG.艾美捷能为您供应通用的IgG(HH)二抗.或者特弁性只绪合IgM的AntiIgM(mu)AmibOdy、IgA的AntiIgA<aIpha-Antibody>IgE的AntiIgE<epsi1.on)AntibOdy等.生命同医学团队整理【二抗的种用来源】一般来说，不同的种属来源与二抗的质地没有必定的联系,来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的试验照没有太多的差别,然而在一些特别的试蛤电，如双标武验里，枝如其中一个一抗是山羊来源的，一个是小双来源的，则相应的二抗分别要抗山羊和抗小双的二抗，这时候，二抗就不能选样山羊或者小鼠来源的.艾美捷有相应的驴来源的二抗，特别适合做类似双标的免疫试验-(二抗的祸联标记】一般来讲，耦联到二抗上的探针主要行陶(辣根过氧化帧HRP和碱性璘酸酹AP或其衍生物APAAP.PAP).荧光基H1.(FC*Rhodamine.TexasRed.PE,Rhodamine,Dy1.ight等)、生物素、金糠粒。选用哪种探针的二抗主要取决于详钮)的试验。对于WeStemmOt和E1.ISA,Ai常用的二抗是防标二抗：而细胞或组织标记试奥(细胞免疫化学，组织免疫化学，流式细胞术中通话运用装光基团标记的二抗,免疫组化中也可以运用辣根过氧化酣或碱性硝酸油标记的二抗.敏如想要更大程度的放大检测信号,可以运川Biotin/Avidin检测系统.在一些英光检测方案中则须要选择不同的荧光标记：而金颗粒标记的二抗则更多的桃用于免授电饿中.艾美拄能为您供应上述全部不同类型标记的二抗生命国医学团队熊现【是否经过血清吸附过的二抗】为削减;抗与样本的非特并性结合，艾美捷还能为您供应不同血清吸附的原装进11二抗.如您的检测样本是人海的蛋白.抗是小很源的单克隆抗体,二抗就须要选揉抗小夙源的二抗,假如您对试脸的特异性要求很高，那我们向您举荐经过人血清吸附过的抗小鼠源的二抗.这种二抗由于经过人血清吸附而解除了与人源组织(如IgG等)可催发生非特异性反应的1.gG因此将非特异性结合降低到用低。Anti-IgGii½Anti-IgG,F(ab,)2fragment在一些如胸腺、脾脏、血液的狙织以及造血细胞、淋巴细胞、B细则等细胞内，通常含有蚊多的FC受体，这时候选挣：抗时燃好送齐4m186»”")2/8团这样的特异性二抗，这样就消退了由于FC部分与G的非特弁性结合.常规的AntHgG(H÷1.>二抗与IgG的正健和轻族都有结合反应.即1.j1.gG的FC的F(at/)2片段都能结合：由于IgG、IgM、IgA旅行保守的轻链结构域.因此Anti-IgG(H+1.)与它的都有交叉反应.而Anti-IgG,F<at/)2fragment经过了IgGFC片段的吸附，因此只与IgG的F(ab-)2片段结合.然而电G、电M、IgA都有保守的轨琏结构域，因此与它们也有交叉反应.Anti-IgG(H+1.)、Anti-IgG(gamma)、Anti-IgM(mu)、AntI-IgA(a1.pha)生命园医学团队整理在当特别的试验里,只须要检测样本里的IgG或者IgM,常规的Anti-IgG(HM)由于与IgG的重链和轻链郎有结合反松而IgG、IgM、IgA都有保守的经链结构域,因此不能特异件的检测某种类型的IgG或者馆M,这时候就缜要针对特别类型Ig分子的二抗，艾美捷备有全面的二抗现货产品并能供应技完整的二抗产品线。主要二抗品牌为全球豉大的二抗产品Jackson二抗以及前沿抗体生产商EarthOX,依据标记分，有HRP、AP,生物素等标记二抗，FfTC,TRITC.Rhodamine.Cy3/5、Dyht等荧光二抗：依据检测物种分，有抗人、大鼠、小双、猪、即、绵羊、山羊、小科、马、我、仓鼠、狗、牛，以及多种细菌类二抗：另外，还有IgG、IgA、IgM以及IgGg、IgG(ab,)2等不同类型抗体