HIV实验室SOP文件.docx

HIV筛查试验室的设置及人员状况为了更好发挥艾滋病检测在艾滋病防治工作中的作用，依据全国艾滋病检测技术规范对于艾滋病的检测要求，我院检验科设置了独立的HIV筛查试脸室。为了使检测工作能够IE常进行，保证HIV检测结果的正确性和精确性，我们不仅对工作环境条件和检测设施加以整改，而且建立了完整的试验室标准化操作规程，以确保HIV检测结果的精确有效。HIV检测试验室分为清洁区、半污染区和操作区，配备了专用的的生物平安柜、电脑、冰箱、酶标仪、洗板机、恒温培育箱、离心机、高压消毒锅等设备和平安防护用品等。依据HIV检测试验室工作的须要，我科配备从事HIV检测工作人员4名，其中专职工作管理人员2名，中级-R生技术职称人员1名，全部人员从业年限均在5年以上。并主动参与省级、市级举办的HIV检测技术培训|,不断提高质量意识、技术水平和业务实力，保证HlV检测工作的质量。HIY筛查试验室负责人：陈俊华人员：章国东王建宝温敏雅HIV箭查试验室工作管理程序样品接收、分发和保管处理，执行本科程序文件标本管理程序和&标本采样管理程序讥样品一旦受理即赐予受理编号C（四）、标本检验检验执行木科程序文件标本检验管理程序和检验项目标准操作规程。（五）、检验依据1、国家标准方法；2、部颁标准方法和检验规范：3、卫生技术部门举荐运用方法；4、有关科技文献或杂志上发表的方法：5、自编规程的运用执行检验方法确认程序讥（六）、检验实施检验人员按检验标准或作业指导书的要求按时完成检验任务，并按程序文件记录档案管理程序做好原始记录。（七）、检验报告的编制、复核和答发按本科程序文件检验报告管理程序执行。（八）、检验方法限制检验必需按全国临床检验操作规程规定的方法或标准检验方法进行，也可用经本科技术负责人批准的非标准检验方法进行。其他检验方法不得采纳。HlV筛查试验室规章制度一、试验室工作制度1、酷爱党，酷爱社会主义，坚持四项基本原则，一心一意为人民服务。2、努力学习政治，刻苦钻研业务，发扬救死扶伤，实行革命人道主义,对病人如亲人，看法亲善，有问必答。3、酷爱本职工作，听从安排，遵守劳动纪律，做到不迟到、不早退，不擅自离开工作岗位，不私白干私活。4、严格执行规章制度，尽职尽责，刚好做好各项检验结果记录，自觉抵制不良之风。5、识大体，顾大局，关切集体，团结友爱，不背后争论，搬弄是祚。6、讲究文明礼貌、主动参与爱国卫生运动，美化环境，保持医院科室整齐，宁静、大方。7、HIV筛查试验室应制定严格的管理制度和标准化操作规程，工作人员必需充分了解各项规定并严格遵照执行。二、岗位责任制1、岗位责任制是保证工作质量和医疗平安，提高工作效率的重要环节。建立岗位责任制，做到人人分工职贲明确，事事有人负责，立足本职，团结互助，相可协调，保证各项任务的成功完成。2、HIV筛杳试验室由有实践阅历的技术人员负责。3、坚固树立把质量放在第一位的思想，在工作中必需加强检查和任查制度，以保证血液质量及医疗平安。4、交接工作必需细致负责，须核对实物和记录，对工作一般状况、存在问题和留意事项应进行具体交待，否则，发生问题由交班人负成。5、职工临时因故离开工作岗位，必需将工作托付给能胜任该项工作的人员，否则，发生问题由原担当该项工作者负责。6、新参与工作的职工，在未熟识和驾驭工作前不能独立工作不能顶岗位，在确能驾驭经考核合格后方可。7、建立HlV筛查试验室专用的精密仪器和重要设备专责岗位制，其他人不得随意运用。严格依据仪器操作规程操作，不行擅自乱改设置。8、凡是一物多人运用的，除共同负责外，应指定一人为该岗位责任制负责人，负责指导正确操纵，定期平安检杳，常常维护保养，保持正常运转，该负贡人有权制止任何违串操作和有害设备平安的行为。9、人员职责分工：每日正班人员负责样品的采集,接收，执行检验任务，做好检验记录,填报检验数据，签发报告及试验室仪器设备的日常维护和保养。副班人员负责帮助正班人员做好试验室的全部日常工作，并负责财检验工作质量的监督，检验报告的复核、发放，结果的说明，试验室室内消毒以及每日医疗废弃物的消毒处理。试验室负责人负责检验资料的归档保管（计算机）工作。三、标本管理制度(一)、样品的采集和处理艾滋病检测最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血。唾液或尿液有时也可作为测试样品。常用的血液样品的采集和处理方法如卜一：1、血清样品采集和处理(1)、用一次性注射器(或真空采血管)抽取肯定量静脉血，室温卜自然放置12h,待血液凝固、血块收缩后再用3000rmin离心15min,吸出血清备用。(2)、如用滤纸片采样，则手指或耳垂局部严格按常规进行消声，在刺破皮肤后，快速把灌纸片沾上，切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。采血后要待血样干燥后再包装送检。2、抗凝血样品采集和处理(1)、用加有抗凝剂的真空采血管(或一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管)，反复轻摇，分别血浆和血细胞备用。(2)、应依据试验要求选用适当的抗凝剂，如CD"CdT淋巴细胞测定可选用KEDTA或肝素或枸椽酸钠，HlY病毒分别、核酸定性/定量检测可选用K1EDTA或枸瞬酸钠。(3),用于核酸定性检测时，采集的抗凝全血应在48h内分别PBMC和血浆，否则应在2448h内分别血浆和血细胞。3、采集样品留意事项(1)、采集样品原则上应按临床采血技术规范操作。(2),采集样品时应留意平安，建议采纳真空采血管及蝶形针具，以避开干脆接触血液：T腌接触HIV感染者/艾滋病(AIDS)病人血液/体液的操作,应戴双层手套。(3)、全部的血液、血清、未固定的组织和组织液样品，均应视为有潜在传染性，都应以平安的方式进行操作。(4>、应象操作未知传染风险样品样，当心存放、拿取和运用全部可能有传染性的质量限制和参考物质。用后的包袱应进行消声。(5)、采血时肯定要留意平安，采血用一次性注射器，谨慎操作，防止发生刺伤皮肤和造成外界污染。(6)、离心机要运用密闭的罐和密封头，以防液体溢出或在超/高速离心时形成气溶胶。(二)样品的保存1、用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20C以下，短期(1周)内进行检测的样品可存放于2-8C。2、用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20C以下，进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上应置于-80'C。3、用于CD<7CDT淋巴细胞测定的样品不能长期保存，样品采集时间超过48h则不行检测。(三)样品的运输I、试验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊状况外股不运输全血。2、应采纳刑0提出的三级包装系统：第一层容器：装样品，要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的四周应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。随样品应附有送检单，送检单应及样品分开放置。其次层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并爱护第层容器，可以装若干个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理。第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。在第三层容器外面要贴标签（数量,收、发件人）。3、血清和血浆样品应在28C条件下由专人运输。用于CD"CD；T淋巴细胞测定的样品应在室温卜.1823C运输。每包装的体积以不超过50ml为宜。4、运输感染性材料必需有记录。5、如分别血浆仍有困难，可干脆将抗凝血20C以下冻存，采纳冰壶冷微运输，避开冻融。6、特殊状况下如需对个别样品进行匏测，可以用特快专递形式投寄，但必需按三级包装系统将盛样品的试管包扎好，避开运用玻璃容器，以保证不会裂开和溢漏。（四）样品的接收1、含有感染性样品的包袱必需在具有处理感染源设备的试验室内由经过培训的、穿戴防护衣的工作人员打开，用后的包袱应进行消毒。2、核对样品及送检单，细致核对标本上病人姓名、年龄、性别、病区、床号、住院号是否及申请单符合。检查样品管有无破损和溢漏，如发觉溢漏应马上将尚存留的样品移出，对样品管和盛器消毒，同时报告有关领导和专家。3、检查样品的状况，视察标木的量、标本类型、是否抗凝或有小凝块样品，记录有无严峻溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等状况，推断标本是否符合检验要求。假如污染过重或者认为样品不能被接受，则应将样品平安废弃。并要将样品状况马上通知送样人。4、打开标本容器时要当心，以防内容物泼溅.样品处理时若内容物有可能溅出，则应在生物平安柜中戴手套进行。同时应戴口罩、防护眼镜，以防皮肤或粘膜污染。5、因特殊临床治疗导致自发荧光的样品不行用于荧光方法测试。6、接收样品时应规范填写样品接收单。7、不符要求的标本，必需刚好填写退回理由单，刚好通知送样人，说明状况，重新留取。不符要求的标本及可疑含有感染性样品用后的包袱同检验后的标木一样进行消声或无害化处理后废介：。（五）标本检测1、离心机要运用密闭的罐和密封头，以防液体溢出或在超/高速离心时形成气溶胶。核标本接收过程中的每步骤，在检测过程中，应严格依据标准化操作规程。2、在标本足够的状况3不能奢侈、随意丢弃或损烁标本。应象操作未知传染风险样品一样，当心存放、拿取和运用全部可能有传染性的质量限制和参考物质。用后的包袱应进行消毒（六）、标本处理检验标本先用含2-31.有效氯消毒剂浸泡半小时，再用高压锅高压消而。然后用双层专用黄色医用垃圾袋专人收集全部废弃医用垃圾。送特地存放医用垃圾处统焚化处理。并做好登记。四、试剂管理制度（一）、选购及审批科主任依据须要定期拟定选购安排，交由院领导审批，批核后由科主任及供应商联系进货。（二）、验收及登记仓管负责人依据供应商供应的试剂及清单对数量、品利I、品牌、包装等进行验收，并将入库数据登记。（三）、贮存冷敏试剂统存放在HlV试验室专用的冰箱内，冷箱保管及温度限制由仓管负责人负货。HIV试剂一般应28C避光保存，在有效期内运用。（四）、出库管理各室提出试剂申领，仓管人填写出库单据，认领人签名后出库。（五）、其它1、试剂的保存应严格依据要求存放，以保证有效期内能有效地运用，杜绝奢侈现象。2、仓管人应对试剂库存定期检查，不运用过期变废的试剂。3、易燃，易爆试剂应分开存放远离火源和电源。4、剧毒试剂必需由科主任和负责科室保卫的同志负责保存，放保险箱内，运用时应有两人在场，并做好登记。五、环境消毒隔离制度1、试验室应分为清洁区和操作区，清洁区要留意爱护不受污染。操作有气溶股可能的标本应配置生物平安柜及其它防护设置，如紫外线灯，排气扇等操作区的I：作台及地面每日用消毒液擦拭一次，有污奥时航时消赤,每周大扫除一次。2、采血室每日操作前用清水擦拭操作台次，采血结束用消毒液擦拭操作台、桌子和地面一次，紫外线每日照耀消毒二次，每月空气细菌培育次,紫外线强度定期测定。3、各种检验标本的收集，送检必需用相应指定的容器留取，不得外溢污染。4、静脉及末稍采血，应严格执行消毒隔离措施，静脉抽血做到一人一针筒一巾一带消毒，所用止血带及纸垫每口消毒，末稍采血人一片一管，杜绝交叉污染。5、次性医用器具包括采血针，注射器、尿杯、血红蛋白微量吸血吸管，应严格做好领发登记，注射器先浸泡消毒后由供应室一对一调换，统处理，其余次性器具浸泡消毒后装入污物袋送焚烧炉焚烧。6、检验人员在进行静脉抽血时应严格遵守无菌操作技术，操作前必需洗手必需戴好帽子及口罩，操作台和手被污染时应用肥皂和流水细致洗手,必要时用消毒液浸泡双手，酒精、碘酒瓶每周更换消市两次。7、溢出试管外的血液，应马上用碘酒棉街擦拭干净，留意防止玻璃碎片刺伤手，并留意试管有无裂开。8、当针头和碎玻璃刺伤手时，用流水冲洗,挤出血水,应马上用碘酒消毒局部。9、试验室操作时应戴上手套。吸取标本，离心振荡等应严格按操作规程，防止自身和试验室受污染。10、已检杳标本及容器分别浸泡于次氯酸钠（2000mgD中两小时后，标本倾弃，一次性容器送焚烧，重且运用的经清洗消毒和灭菌后再运用，均要有记录。有毒化学试剂和放射性试剂运用后要经无害化处理，防止污染环境。11、非科室工作人员不准进入试验室，外来人员参观需经科主任同意方可进入。六、试验台消毒措施1、试验台消毒措施必需符合艾滋病试验室的通用生物平安要求。由专人按特定程序和方法进行清洁和消毒。2、分面的清洁消毒，保持清洁、湿式打扫。每天起先工作前用湿布抹擦1次，地面用湿拖把擦1次，禁用干抹干扫。抹布和拖把等清洁用具试验室专用，不得混用，用后洗净喙干，下班前用含氯消毒剂（次氯酸钠，含有效氯200OnIg儿）、0.20.51%过氧乙酸或75%乙醇抹擦1次。也可用便捷式高强度紫外线消毒器近距离照耀消毒。3、应象操作未知传染风险样品样进行消毒及灭菌，当心存放、拿取和运用全部可能有传染性的血液、质量限制和参考物质，若被上述物品明显污染，如具传染性的标本或培育物外溢，溅泼或器皿打破，洒落于台面，应马上用消毒液消声，用5000mg1.有效氯消毒剂、过氧乙酸或乙静酒于污染的台面，并使消毒液浸过污染表面，保持3060min后再擦，拖把用后浸于上述消毒液内Ih以上。4、各类在试验室试验台上操作后的废弃物品均应视作物染物分类处理，全部废弃物应视为HlY污染物品，依据传染病防治法处理。七、废弃物处置和试验室消毒1、废弃物处置废弃物处置应符合试验室生物平安通用要求（GB19489-2004）和消毒技术规范（2002年版）讥从艾滋病试验室出来的全部废弃物，包括不再须要的样品、培育物和其它物品，均应视为感染性废弃物，应置于专用的密封防漏容器中，平安运至消毒室，并在高压消毒后再进行处理或废弃。2、HlV常用的物理消毒方法压力蒸汽消毒，121C,保持1520min;干燥空气烘箱消毒（干烤消毒），M0C保持23h.3、HlV常用的化学消毒方法HlY最常用的化学消毒剂是含氯消毒剂（次氯酸钠，含有效氯20005000mg1.）,75%乙辞和2$戊二醛,保持IO30min.4、废弃物缸：5000mg1.次氯酸钠。5、生物平安柜工作台面和仪器表面：75%乙醇。6、溢出物：5000mg1.次氯酸钠。7、污染的台面和器具：2000mg1.次氯酸钠,也可以用过氧化氢或过氧乙酸。器械可用2%戊二醛浸泡消声。八、消毒液的配制及运用措施1、HlV试验室最常用的化学消毒剂是含氯消毒剂（次氯酸钠，含有效氯2000-500Omg/1.）、75%乙醇和2%戊二醛,保持1030min。2、含氯消毒剂的配制：次氯酸钠原液运用前进行1：20-1：50稀释（2000-500Omg/1.）或联昌84运用前进行1：10-1：25（2000-5000mg1.）稀释后，用于试验室内的消毒。3、乙醉，俗称“酒精”，能够杀灭多种细菌，对HlV病毒有肯定的杀灭作用，7075$的效果最好。因此，运用前簇新配置足量707除的乙醇,用于生物平安柜、工作台面和仪器表面的消毒，可以达到最佳的消毒效果C4、过氧乙酸也是目前运用比较广泛的种高效消毒剂，欲新配置13%的过氯乙酸液蒸，用于地面、墙壁、试验器材及试验室内资料、文件、书本等物品的消毒。0.0低的过氯乙酸用于试验室工作人员手浸泡120分钟，再用肥皂洗手。5、2%戊二醛用于可浸泡物品的消毒，医疗器械等。6、HlV试验室常用化学消毒剂的配置，木者多用多配，少用少配，现用现配的原则，保证消毒剂运用时的浓度，保证消毒效果.九、消防平安制度1、依据“谁主管、谁负责”的原则，实行科室负责制。2、主管领导和保卫科对全体职工常常进行消防平安教化，提高思想相识，驾驭消防学问和消防器材的运用。3、严格执行平安防火管理制度各种火种及易燃易爆物品，必需严格分区，保持肯定的平安距离。试验室实施单向流向制度，通道不得乱堆放易燃爆物品和杂物。4、严禁在试验室内吸烟C5、电器的安装及拆除，必需由电工进行，严禁乱接电源，乱后电线。6、各种机电设备、高温电器设备、耐高压容器和设施，运用时必需有专人负责,随时检杳，消退隐患，严防事故发生。7、各防火区域设置的消防器材和设备，应定期进行检查，修理和更换,随时处于完好状态，并不得随意挪动。8、任何人发觉火、水灾等隐患者，必需刚好向科领导报告。科主任刚膜，或者被含有艾滋病病毒的血液、体液污染了的针头及其他利器刺破皮肤,有可能被艾滋病病毒感染的状况。(1)、防护措施：1 .医务人员进行有可能接触病人血液、体液的诊疗和护理操作时必需戴手套，操作完毕，脱去手套后马上洗手，必要时进行手消毒.2 .在诊疗、护理操作过程中，有可能发生血液、体液飞溅到医务人员的面部时，医务人员应当戴手套、具有防渗透性能的口罩、防护眼镜；有可能发生血液、体液大面积飞溅或者有可能污染医务人员的身体时，还应当穿戴具有防渗透性能的隔离衣或者围裙3 .医务人员手部皮肤发生破损，在进行有可能接触病人血液、体液的诊疗和护理操作时必需戴双层手套。4 .医务人员在进行侵袭性诊疗，护理操作过程中，要保证足够的光线,并特殊留意防止被针头、缝合针、刀片等锐器刺伤或者划伤。5 .运用后的锐器应当干脆放入耐剌、防渗漏的利器盒，也可运用具有平安性能的注射器、输液器等医用锐怒，以防刺伤。6 .禁止将运用后的一次性针头重新套上针头套。禁止用手干脆接触运用后的针头、刀片等锐器。(二)、处理措施：1 .用肥皂液和流淌水清洗污染的皮肤，用生理盐水冲洗粘膜。2 .如有伤口，应当在伤口旁端轻轻挤压，尽可能挤出损伤处的血液，再用肥皂液和流淌水进行冲洗，禁止进行伤口的局部挤压。3 .受伤部位的伤口冲洗后，应当用消毒液，如75%的酒精或者0.5%的碘伏等进行消毒，并包扎伤口:被暴露的粘膜，应当反第用生理盐水冲洗干净。4 .在暴露后的O周、第四周、第八周、第十二周及六个月时抽血进行检测艾滋病病毒抗体。5 .预防性用药应当在发生艾滋病病毒职业暴露后尽早起先，最好在四小时内实施，最迟不得超过二十四小时：即使超过24小时，也应当实施预防性用药，连续运用28天。6 .发生艾滋病病毒职业暴露后马上通知院感科备案、评估。十二、箫查检验程序1、筛查试剂必需是经国家食品药品监督管理局注册批准、批批检合格、在有效期内的试剂。举荐运用经临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。2、筛查方法(1)、常用的筛查方法是醐联免疫试验(E1.ISA)目前国内外主要运用第三代(双抗原夹心法)试剂，少数运用其次代试剂。血源笳查仍以第三代E1.ISA为主，国际上有些国家和地区己将线性免疫酣测定(第四代E1.ISA试剂)用于血源筛行。第四代E1.ISA试剂是最近发展起来的HIV抗原抗体联合测定试剂，可同时检测P24抗原和抗HlYT/2抗体。及第三代抗HlVT/2试剂相比，检出时间提前了49d.其优点在能同时检测抗原抗体，降低血源笳查的残余危急度。(2)、快速检测(RT)及其它检测随着对IIIV感染者和AIDS病人抗逆转录病毒治疗的进展，及对无症状HIv感染者供应自愿闻问检测(VCT)的迫切需求，简便、快速的Hlv检测方法被广泛应用。常用的主要有以下几种:、明股颗粒凝集试验(PA)：PA是HIV血清抗体检测的种简便方法,是将HlV抗原致敏明胶颗粒作为载体，及待检样品作用，混匀后保温(一般为室温)。当待检样品含有HIV抗体时，经抗原致敏的明股颗粒及抗体发生抗原-抗体反应，依据明股颗粒在孔中的凝集状况判读结果。PA试剂有两种,HBr-I和HlV-2抗原共同致敏的PA试剂(AFDHlVT/2PA),已经我国食品药品监督管理局(SbDA)注册批准：HIV1、HIV-2抗原分新颖敏的PA试剂(SERODIA-HlV-I/2)可初步区分HlV-I型和HIV-2型,目前我国尚未引进。、斑点EIA或称斑点E1.ISA(dot-EIA)；以硝酸纤维膜为载体,将HlY抗原滴在膜上成点状，即为固相抗原。加血清样品作用，以后步骤同E1.ISA0阳性结果在膜上抗原部位显示出有色斑点。反应时间在10min以内，运用抗原量少。、斑点免疫肢体金(或胶体晒)快速试验：及庞点EIA相像，也是以硝酸纤维膜为载体。区分在于不用酎标记抗体，而代之以红色的股体金(或胶体硒)A蛋白，用渗滤法作为洗涤方法。试剂稳定，可室温长期保存。试验时不需任何设备，快速、简便、特异性较好，敏感性约相当于中度敏感的E1.ISA,适用于应急检测、门诊急诊个体检测。目前已有在国内被SFDA批准注册的国外进口试剂和国内产品。一股同在10-30min内判读结果。、艾滋病唾液检测卡：在硝酸纤维膜上包被人工合成的HIVgfyllgp36蛋白抗原，可同时检测含在唾液中的HlYT/HIV-2抗体,原理为酶免疫间接法。主要检测唾液中的HIVIgA及IgG抗体，敏感性特异性及E1.lSA相近，可避开静脉穿刺。但样品预处理时间长且售价较高。以唾液为样品测定HlV抗体的E1.lSA、免疫印迹法(WB)试剂已经美国FDA批准。、其它快速筛查试验方法：家庭HlV检测（HomeAccessSystem）等。3、尿液HlV抗体检测1996年美国lDA首次批准HlVT尿液E1.ISA试剂，我国也正在研制尿液HlV抗体检测试剂。主要适用于静脉注射毒品（IDUs）人群和其它高危人群的大面积流行病学调查、监测。筛查阳性者仍需采血做确认试验才能确定。4、筛查试验依据检测目的选用符合要求的筛杳试剂对样品进行初筛和垂纭检测（复检）。5、初筛试验：以第三代E1.lSA（双抗原夹心法）为例。（1）试验打算：试验起先前将试剂和样品放置在室温（1823C）,按试脸室SOP做好试剂打算。磷酸盐缓冲液：若液体内有结晶,应放置在37直至溶解，用蒸馄水1：25稀释浓缩液，4C保存2周。TMB底物液：运用前配制，TMB液和过氧化腺液等量混匀。IM硫酸终止液：85ml蒸懦水中加入5ml浓喧酸。备好试剂盒、待检样品和外部比照质控血清后，按试剂盒说明书以及质控和平安防护要求进行筛查检测。（2）试验操作、装好所需运用数目的孔条,每孔均加入100Ul样品稀释液。设3个阴性比照孔，1个IIlYT阳性比照孔，若须要可再设1个HIY-2阳性比照孔。、每孔加入50Pl待检样品及比照（比照耍后加），未用孔用样品稀糅液加满以溶解结合物球，以免堵塞洗板机孔。可震摇15S,37±2°C孵育60±5mi11o、置洗板机上洗涤6遍（用洗液将反应孔完全加满,静置3060S,共洗涤6遍，洗完后孔上方及底部不应残存液体,禁止在滤纸上拍干）。、每孔加入100UI底物液，勿搅动，室温避光孵育30±2min°、每孔加入100MlIM硫酸终止反应，充分混匀。、在2h内置于前标仪读数，单波长450nm,或双波长450/63Onm测OD值。（3）试脸结果、阴性比照（NC），HlVT阳性比照（PCI）,HIV2阳性比照（PC2）。NC必需V0.25方可用，解除NC20.25的值，计算NC平均值。NC界限范围：0.6倍NC均值VNCVI.4倍NC均值。、符合以下条件的试验成立：两个以上的NC可用。PCl-NC均值0.4,PC2-NC均值30.4。、CUtOff值=阴性比照均值+0.100n小于CUtOff为阴性，大于或等于CUtOff为阳性。（4）报告：对呈阴性反应的样品，可由实施检测的试验室出具HIY抗体阴性报告；对呈阳性反应的样品，须进行复检，不能出阳性报告。6、电检试验：对初筛呈阳性反应的样品用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重更检测。如两种试剂复测均呈阴性反应，则报告HlY抗体阴性；如均呈阳性反应，或阴阳，需送艾滋病确认试验室进行确认（见图l）(2),临界值=阴性比照A均值+012、正常状况下，阴性比照孔的OD值WOIO(若1孔阴性比照的OD值0.1应舍弃，若有2孔或2孔以上阴性比照的OD值0.1,应重复试验.)。样品OD值V临界值者为IIIV抗体阴性。(4),正常状况卜.，阳性比照孔的OD值20.80(若1孔阳性比照的OD值VO.8应舍弃,若有2孔或2孔以上阳性比照的OD值VO.8,应重更试验。样品OD值2临界值者为HIV抗体阳性。3、HIV泅定(蛋白印迹法)结果的判定方法依据卫生部1990(2)号文件的规定，蛋白印迹法的推断标准为：(I)-阳性:至少有一条env(gpl60,gpl20,gp41)带和一条Pol(P65,p51,p32)带或至少有条env带和一条gag(p5条p24,pl8)带或至少有*条env带和一条gag带，一条pol带或至少2条env带。(2),阴性：无病毒特异带。(3)、可疑：一条gag带和一条POl带或只有gag带或只有POl带。十四、检测结果报告规程1、从事HlV检测1：作的技术人员必需接受过上岗前的培训和定期熨训|。2、HIV检测工作必需在独立的试验室内进行。3、初筛检测试剂必需是经国家食品药品监督管理局注册批准、中国药品生物制品检定所批批检合格且在有效期内的试剂。4、依据全国艾滋病检测技术规范的要求建立健全质量管理制度、试验室平安标准操作规程、平安防护工作等。5、检测结果报告前应填写好原始试验记录资料，包括试验日期，试验操作记录，检测样晶及空白、阴、阳比照结果,S/CO值、临界值、试剂厂只要其母亲感染了Hl1.母体内存在HIV抗体，婴儿诞生后HIv抗体检测一般都是阳性。假如要推断一个婴儿是否感染HIV,则应当等到一岁半（18个月）以后再做检测，检测结果阳性时才能说明该婴儿感染了HIV。（二）、阴性结果的说明1、检测者处于窗口期HlV从感染到能够检测出来有一段时期，这段时期称为窗口期，窗口期般是2周到2个月。拿到个阴性结果，首先要确定窗口期是否已过，假如确定最终一次危急行为距抽血作检测时已过窗口期，这时基本可以确定检测者未感染HJV。假如窗口期末过或者抽血化验之后又发生危急行为（如又共用针具或未实行爱护措施的性行为），同样也不能确定抽血者没有感染HI1.2、检测者未感染HlV假如检测结果阴性，最终一次危急行为又过了窗口期，那可以判定检测未感染IIIVo（三）、不确定结果结果不能确定是指住进行HIV抗体检测的确认试验时，检测结果不是阴性，又够阳性标准，界乎于阳性及阴性之间的种结果。出现不确定结果一般建议过三个月后再匏查，出现不确定结果一股有以下几种缘由：I、感染处于窗口期，从HlY进人体内到检测这段时间还不够长，因此血清还没有形成典型的抗体反应。2、艾滋病进展到终末期，抗体水平卜.降。3、有其它缘由：如某些恶性疾病，怀孕，输血或器官移植等状况，身体会产生,些抗体，其反应及HlY的某些蛋白抗体所引起的反应相像十六、检测数据的记录及保存1、试验原始记录表应按试验要求，设计操作的原始记录表，标明空白比照、阳性比照、阴性比照、外部比照以及待检样品的位置，便于指导试验人员加样。要注明试剂盒厂家、测定方法、批号、效期、操作人员和熨核人员姓名及检测日期.2、标本的登记收到标本后，刚好登记有关参数，包括受检者姓名或代号、试管编号、性别、年龄、职业、送检总位、人群类别、检验结果、送检日期、报告日期、备注（必要时记录通信地址）等。3、HIV阳性标本的保存记录包括HlY阳性标本的类型、贮存量、贮存温度、贮存起始时间以及标本保管人姓名。4、文件存档试验原始记录表、打印数据、检测记录表、标本登记、标木保存记录以及仪器设备修理和校准记录等都应当妥当存档保存15年以上。并同时运用计算机保存各种文件和记录。十七、呈阳性反应标本的处理程序1、对HIY抗体初筛试验，呈阴性反应的样品可出具''HIV抗体阴性”报告（可用附表1）:对初笳呈阳性反应的样品用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛位试剂垂更检测.如两种试剂第测均呈阴性反应，则报告“HIV抗体筛查报告”（见附表1）阴性：如均呈阳性反应，或一阴一阳，则应依据全国HIV检测管理规范的要求送艾滋病确认试验室进行确证试验。对初筛试验呈阳性反应者不能出阳性报告，可出具“HIV抗体待复查”报告（附表1）。2、初筛试验呈阳性反应样品，需送上级试验室进行豆测或确认，须要填写“HIV抗体更测送检单”（附表2）,经试验室负责人和1名专业检臆人员审核签字。送县疾病限制中心艾滋病筛查中心试验室，或在本试验室曳检后干脆送安阳市艾滋病确认试验室。3、初筛试验呈阳性反应样品，进一步送检、木室冰冻保存后不在须要的样品的处置应符合试验室生物平安通用要求（GB19489-2004）和消市技术规范（2002年版）讥4、从HIV试验室出来的全部废弃物，包括不再须要的样品、培育物和其它物品，均应视为感染性废弃物，应置于专用的密封防漏容器中，平安运至消毒室，并在高压消毒后再进行处理或废弃。5、全部废弃物应依据HIV污染物品处理。由专人按木试验室制定的程序和方法进行清洁和消毒。6、严格HlV试验室的废弃物的消毒处理制度，做好登记。7、检验科主任定期负责检杳，操作处理不当的依据科室有关规定惩罚。十八、检测数据季报方案和程序1、艾滋病筛查试验室和艾滋病检测点应于每季度首月5日前填写TllV抗体检测数季报表"（附表6）,向艾滋病筛查中心试验室报告上季度检测状况。没有艾滋病筛查中心试验室的地区可干脆向艾滋病确认中心试验室报告。艾滋病停查试舱室和艾滋病检调点未设汽<.i筛查中心试验空的地区图2HIV抗体检测状况季报流程2、艾滋病筛查中心试验室应于每季度首月10日前将本试验室和本辖区内各筛杳试脸室上季度报告的检测状况（附表6>汇总，报告艾滋病确认中心试验室。3、艾滋病确认试验室应于每季度首月10日前将上季度检测状况汇总后（附表6）,报告当地艾滋病确认中心试验室和同级卫生行政部门。4、艾滋病确认中心试验室应刚好收集、整理和分析辖区内HlV抗体检测状况，于每季首月15日前向省级卫生行政部门和中国疾病预防限制中心性病艾滋病预防限制中心（简称中国疾控中心性艾中心）参比试验室报告。同时，按艾滋病疫情报告的有关规定上报疫情。5、在非送检样品中（如专项调查及探讨等）发觉的艾滋病病毒抗体阳性者，应向所在地的省疾病预防限制中心报告，并填写“H1V抗体确认检测报告单”（附表3）,报中国疾控中心性艾中心参比试验室。6、试验室上报检测结果的同时，应随时报同级监测人员，以便刚好随访调查。十九、感染追踪处理方案（一）、追踪人群1、有明确受血或血液制品史，并解除性传播、母婴传播、经国家确证明脸室确认的艾滋病病得抗体阳性者：2、无偿献血工作中发觉的艾滋病病毒抗体阳性献血人员。（二）、工作步骤1、对供血或受血的追访，须以健康跟踪服务或科研的名义进行，系统体检并采血预备有关的检验.2、对发觉的受血艾滋病病有感染者制定具体的个人追踪方案，确定追踪人员，应有一名近期参及治疗的医生参与。3、对供血者追踪，由卫生防疫机构会同采供血机构的专业技术人员进行。（三）、善后处理：对受血的艾滋病病毒感染者由县卫生防疫机构制定专人建立健康档案，实施预防监护、医疗照看和管理。并定期进行随访和医疗保健询问服务。特殊必要时应告知受血感染者有关真实状况。（四）、对HlV抗体阴性者，如近期有高危行为如性乱史、吸毒史、受血史、献血浆史，或有急性流感症状等状况，为解除窗口期的可能，建议每3个月究查一次，连续2次。二十、保密程序制度1、HIV检测试验室的全部工作人员要具有高度的保密意识。不得对无关人员透漏任何试验室内部的信息。2,HIV检测试验室要有专人负责妥当保存及HIV/A1DS相关检测项目的全部资料（包括送检单、各种试验记录、感染者档案、报告单.的发放），不得擅自修改和销毁。未经省级卫生行政部门许可，不得向无关人员或单位供应任何状况。严格遵守保密制度，杜绝泄密事务的发生。2、我院HIY试验室属于筛杳试验室，检测的结果也不是最终结果，检测到阳性结果应刚好启动应急预案，依据WHO提出的三级包装系统送到上级试验室作进步确认。此时，不能出具HlY抗体阳性的结果报告，更不能告知受检者本人.3,确认试验室确认阳性结果，以机密级向送检单位出具阳性报告；送检单位接到报告后，由专人负责接收，并应刚好会同医院感染科上报县卫生防疫站和卫生局。在对阳性者告知检测结果时要先做好法律、医学、生活等方面的询问。4、经确认的阳性标本，包括在试验室留存的标本，应送省级HIV抗体确认中心或省级卫生行政部门指定的单位保存，不得擅自处理。标本保存时间至少5年。5、当发生职业暴露事故后，无论职业暴露事故级别的大小，对涉及的职业暴露者，均应留意做好保密工作。任何个得到信息的人都要做好保密工作。保密守则：1、不该说的机密肯定不说：2、不该问的机密肯定不问：3,不该看的机密肯定不看；4、不该记录的机密肯定不记录：5、不在非保密本上记录机密;6、不在私人通信中涉及机密：7、不在公共场所和家属、子女、亲友面前谈论机密：8、不在不利于保密的地方存放机密文件资料；9、不在一般电话、明码电话、一般邮件传达机密事项：10、不携带机密材料巡游、参观、探亲、访友和出入公共场所。二十一、质量管理制度1、依据省临检中心的有关规定，开展试验室室内的质量限制，绘制HJV试验室室内质量限制图，包括20次OD值、S、靶值、CV%值。对室内质控应每日有记录，有每月的S、靶值、0$值。对失控状况有订正方法，有预防性措施。2、主动参与省临检中心组织的室间质控活动，对每次质控评价应有记录。3、计量仪器应定期校正，每年一次。4、精密分析仪器由专人负货，有运用记录和修理记录。5、商品化的试剂盒的申购由专业组长负责申报，每月次报科主任审批，不得运用过期，无批准文号的劣质试剂，进货统一由科室管理，自配试剂须严格校正后方可运用。6、建立完整的HIV筛查试验室标准化操作程序，并应严格按程序执行。7、当口发出的全部检验报告单须经当日科室总值班人员严格审核后方可发出。8、科室在完成严格的室内、室间质量限制体系的同时，应逐步建立全而质量限制体系，对标木的采集，运输，保存等纳入严格的管理之中。检查试剂，此时可更换试剂以查明缘由。假如结果仍不在允许范围，则进行下一步。四、重新校准，重测失控项目。用新的校准液校准仪器，解除校准液的缘由。五、请实际工作阅历丰富的工作人员或专家的帮助。假如前五步都未能得到在控结果，那可能是仪器或试剂的缘由，只有和仪器或试剂厂家联系恳求技术支援。二十三、外部质控血清的制备和保存1、质控血清的制备和保存(以EuSA试验检测HlV抗体为例)在每次试验中必需包含有内部比照质控血清和外部比照质控血清。(1)、内部比照质控血清指试剂盒内供应的阳性和阴性比照血清.内部比照是质量限制的基础。每次检测必需运用内部比照，而且只能在同批号的试剂盒中运用。(2)、外部比照质控血清是为了监控检测的重更性和稳定性以及试剂盒批间或孔间差异而由试验室设置的一套比照血清，包括强阳性、弱阳性和阴性比照血清°也可以只设置个弱阳性比照，以该试剂盒临界值(Cut-off)的23倍为宜。