临床核酸检测、细菌培养、 血清学检查等百日咳病原检测方法要点及区别.docx

临床核酸检测、细菌培养、血清学检查等百日咳病原检测方法要点及区别百日咳是由百日咳鲍特菌引起的急性呼吸道传染病，是临床常见的呼吸系统疾病，曾是全球儿童发病和死亡的重要原因之一。2022年百日咳报告发病率大幅上升，发病以09岁儿童特别是无百白破联合疫苗接种史或未完成3剂次接种的婴儿为主。百日咳在卡他期末及痉咳期可见白细胞增多，痉咳期最明显，多为（2050）X109/L,少数可达70X109/L以上，以淋巴细胞为主，多见于婴幼儿，有研究认为，在外周血涂片中发现裂隙淋巴细胞可能是简单、快速的诊断百日咳的方法，但对于检验人员技术要求较高，要求能够熟练掌握细胞形态学。核酸检测核酸扩增法如PCR是诊断百日咳非常敏感的方法。是目前最常用的百日咳杆菌检测方法。核酸检测法检测迅速，但对技术要求和成本较高，难以在基层医院开展。最好在发病3周内采集标本，阳性率高，但即使超过4周，也可获得较准确结果。需要注意，PCR阳性结果并非总是与临床表现相关，因为PCR不能区分有无活的细菌生长。有研究证实经抗生素有效治疗21d后仍可检出百日咳鲍特菌核酸检测阳性。细菌培养细菌培养并分离百日咳鲍特菌特异性高，是百日咳诊断的金标准，在分离百日咳鲍特菌及药物敏感性检测方面有重要意义。但细菌培养的灵敏度较低，容易受到抗生素、疫苗、既往感染、病程较长及样本保存运送条件等影响，导致检出率下降。百日咳鲍特菌专性需氧，营养要求很高，生长缓慢，检出周期较长，所以临床很少用于百日咳诊断。血清学检查1）急性期和恢复期的双份血清标本中特异性抗体滴度，酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测，主要用于回顾性诊断或不典型病例的辅助诊断。在实际临床应用过程中发现，需要发病数周才能进行诊断，需要注意1年内疫苗接种史和既往感染都会导致假阳性。2）单份血清中百日咳特异性IgM、IgG、IgA抗体，由于IgA、IgM抗体检测在敏感性、特异性及可重复性方面不及IgG抗体，因此最常用PT-IgG抗体检测，可以作为早期诊断的参考，但需要充分考虑患儿年龄和免疫状态，而且商品化的试剂盒仍需进一步改进和标准化。